Korean Journal of Food Preservation
The Korean Society of Food Preservation
ARTICLE

복숭아 품종별 핵과 종자의 항염증 및 항산화 효과간의 상관관계

정경미1,*, 백승화2
Kyung-Mi Jung1,*, Seung-hwa Baek2
1경상북도 농업기술원 청도복숭아연구소
2안전성평가연구소 예측독성본부 시스템독성연구센터
1Cheongdo Peach Research Institute, GyeongSangBuk-Do Agricultural Technology Administration, Cheongdo 38315, Korea
2Department of Predictive Toxicology, Korea Institute of Toxicology, Daejeon 34114, Korea
*kmgod@korea.kr82-54-373-5486, 82-54-373-5487

© The Korean Society of Food Preservation. This is an Open-Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

Received: Nov 20, 2017; Revised: Jan 3, 2018; Accepted: Feb 9, 2018

Abstract

Peach seeds contain a large amount of phenolic components and exhibit excellent physiological effects in various diseases. We examined the antioxidant effects of stone and seed of three peach cultivars (Miwhang, MH; Kanoiwa hakuto, KH; and Cheonhong, CH) by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) assay, ferric reducing activity of plasma (FRAP) assay, and cupric ion reducing antioxidant capacity (CUPRAC) reduction. The results showed that the stone extracts of CH had higher levels of total phenols and flavonoids than those of the other cultivars do, and the stone extracts of KH and CH have the potential to reduce DPPH, FRAP, and CUPRAC activities. In addition, we found that KH, MH, and CH stone extracts decreased nitric oxide generation in RAW 264.7 and BV2 cells. The total phenol and flavonoid contents had no significant correlation with anti-oxidant activities. On the other hand, the anti-inflammatory activity had a low linear correlation with anti-oxidant activities and total phenol and flavonoid contents. The present results suggest that the correlation between antioxidant and anti-inflammatory effects of stone and seed, and the appropriate combination of the stone and seed extracts could be used as an anti-inflammatory treatment and prevention material, respectively.

Keywords: Prunus persica; stone; seed; anti-oxidant; anti-inflammatory

서 론

생체 내에서 발생하는 활성산소(reactive oxygen species) 는 생체막의 구성 성분인 불포화지방산을 공격하여 과산화 물을 축적시키며, 이로 인해 생체 기능의 저하나 노화 및 각종 성 인병을 유발시킨다. 이러한 활성산소에 대응하는 항산화 활성은 페놀 함량과 상관관계에 있고, 또한 두개 이상의 수산기(-OH)를 가지는 페놀성 물질은 항산화 작용 과 항균 작용도 갖는다고 보고되었다(1,2). 최근 항산화 활 성 연구에서 살구를 비롯하여 포도, 복숭아 등의 종자가 잎이나 과실에 비해 높은 항산화능을 갖는다고 보고되었으 며(3,4), 이에 따라 과육을 섭취하고 버려지는 종자 등을 활용할 수 있는 방안을 모색해야 할 필요성이 점차 대두되 고 있다.

복숭아(Prunus persica L. Batsch)는 장미과(Rosaceae), 자 두속(Prunus), 복숭아과속(Amygdalus)에 속하는 온대 낙엽 성 과수로서, 주성분은 수분과 당분이며 유기산, 에스테르, 펙틴 등도 풍부하고 과육은 aspartic acid, serine과 같은 아미 노산을 많이 함유하고 있다(5). 복숭아 관련 항산화 및 항염 증 연구에서는 야생 복숭아 가지의 에틸아세테이트 추출물 이 천연 항산화제인 tocopherol 및 합성 항산화제인 BHA보 다 탁월한 항산화 효과를 나타내고, hyaluronidase 저해에 의한 항염증 효과 시험에서는 항염증 표준품인 ketoprofen 보다는 활성이 낮으나, ibuprofen과 indomethacin보다는 높 은 항염증 효과가 나타난다는 연구가 보고되었다(6). 저장 성 시험에서는 46℃의 열풍 처리로 전반적인 품질은 우수해 졌으며, 폴리페놀 및 플라보노이드 함량과 이에 따른 항산 화 활성은 대조군과 큰 차이를 보이지 않았고(7), 복숭아 과피와 과육의 에틸아세테이트 추출물은 ascorbic acid에 견줄만한 높은 항산화 활성과 항균 활성을 가진다고 보고되 었다(8). 또한, 예로부터 민간에서 한약재로 많이 사용되었 던 도인에 관한 연구로는 죽상동맥경화 예방, 항혈전기능 등 심혈관계 질환에서 우수한 생리적 효과가 보고되었으며 tyrosinase 저해활성이 강한 안식향산 등에 의한 효소적 갈 변현상 억제, in vivoin vitro에서 화학적, 생물학적인 인자 에 의한 DNA의 손상을 감지하는 comet assay를 이용한 평가에서 복숭아 종자 추출물은 방사선에 의한 림프구 DNA손상에 대한 방어효과를 가진다고 보고하였다(9-11).

위의 연구결과에서 보는 바와 같이 대부분 과실의 과육 과 종자에 관련된 연구는 많았지만, 복숭아 핵에 관련된 연구는 거의 없는 실정이다. 또한 복숭아의 품종별 종자 및 핵의 기능성 성분의 탐색에 대한 연구결과가 미비한 상태이므로 본 연구에서는 국내에서 재배되고 있는 복숭아 의 품종별 핵과 종자를 이용하여 항산화 및 항염증 활성에 관한 연구를 실시하고, 이에 따른 상관관계를 파악하여 기 능성 식품 및 생리활성 소재를 개발하는 기초자료로 활용하 고자 한다.

재료 및 방법

실험 재료

본 연구에 사용한 복숭아(P. persica L. Batsch)는 2014년 경상북도 농업기술원 청도복숭아연구소의 포장에서 수확 한 품종으로 외관이 양호하고 신선한 것으로 균일하게 선별 하였으며, 미황(Mihwang)은 6월 하순, 가납암백도(Kanoiwa Hakuto)와 천홍(Cheonhong)은 각각 7월 하순에 수확하여 사용하였다. 미황은 청도복숭아연구소에서 육성한 품종으 로 과피에 털이 있는 조생종 황육계통이고, 가납암백도는 털이 있는 유모종 백육계통이며, 천홍은 털이 없는 무모종 황육계통이다. 수확 후 과육을 제거한 핵을 건조하여 종자 와 분리한 후 각각 실험에 사용하였다. 각 품종별 과실 특성 은 Table 1에 나타내었다.

Table 1. Quality character istics of peach fruit
Cultivar1) Ripening time (month/day) Weight (g) Sugar content (°Bx) Total acidity (%) Hardness (kg/∅5 mm) Hairy /Hairless Color
MH 6/28 250 11.5 0.13 0.53 Hairy Yellow
KH 7/19 251 11.8 0.12 0.92 Hairy White
CH 7/20 245 10.8 0.80 1.43 Hairless Yellow

MH, Miwhang; KH, Kanoiwa Hakuto; CH, Cheonhong.

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시료 준비

각 품종별 복숭아의 분리한 핵과 종자를 각각 건조한 후 분쇄하여 polyethylene bag으로 포장하여 -40℃ 냉동고에 보관하면서 시료로 사용하였다. 분석 시료는 분쇄된 각 시 료 5 g에 80% 에탄올을 1:10(w/v)의 비율로 1일간 75℃, 130 rpm에서 진탕추출한 후(HK-SI25C, Hankuk S&I Co., Hwaseong, Korea) 여과지(No.2, WhatmanTM International Ltd., Maidstone, UK)로 여과하여 얻은 용액을 감압농축기 (OSB-2000, Eyela Co., Tokyo, Japan)로 농축한 후 DMSO (Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA)를 용매 로 하여 10 mg/mL 및 20 mg/mL의 농도로 설정하여 실험에 사용하였다.

총 phenol 함량 분석

총 phenol 함량은 Folin-Denis 방법을 변형하여 측정하였 다(12). 96-well plate에 시료액(20 mg/mL) 2 μL를 증류수 20 μL와 Folin-Ciocalteu's phenol reagent(Sigma-Aldrich Chemical Co.) 10 μL를 첨가하여 실온에서 6분간 반응시키 고, 7% Na2CO3 용액 100 μL와 증류수 70 μL를 첨가하여 실온에서 90분간 반응시킨 후, 595 nm에서 흡광도를 측정 하였다. 표준물질로 gallic acid(Sigma-Aldrich Chemical Co.)를 사용하여 시료와 동일한 방법으로 분석하여 검량선 을 작성한 후 phenol 함량을 산출하였다.

총 flavonoid 함량 분석

총 flavonoid 함량 측정은 Zhishen 등의 방법을 변형하여 측정하였다(13). 96-well plate에 시료액(20 mg/mL) 2 μL를 증류수 100 μL와 5% NaNO2 용액 5 μL를 혼합하여 실온에 서 10분간 반응 시키고, 10% AlCl3·6H2O 용액 10 μL를 첨가하여 다시 실온에서 10분간 반응시킨 후, 1 M NaOH (Sigma-Aldrich Chemical Co.) 용액 40 μL와 증류수 45 μL를 첨가하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 catechin(Sigma-Aldrich Chemical Co.)을 사용하여 시료와 동일한 방법으로 분석하여 검량선을 작성한 후 총 flavonoid 함량을 산출하였다.

1.1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) radical 소거 활성 측정

DPPH radical 소거 활성 측정은 Blois의 방법을 변형하여 측정하였다(14). 96-well plate에 시료액(20 mg/mL) 2 μL와 50% 에탄올에 녹인 40 mM DPPH(Sigma-Aldrich Chemical Co.) 용액 198 μL를 가하여 총액의 부피가 200 μL가 되도록 하였다. 이 반응액을 실온에서 빛을 차단하여 약 10분간 반응시킨 후 분광광도계로 517 nm에서 흡광도를 측정하였 다. 결과는 추출물의 첨가구와 무 첨가구의 흡광도를 통해 백분율로 나타내었다.

DPPH radical scavenging activity ( % ) = [ ( A control-A sample ) /  A control ] × 100

  • A : Absorbance at OD 517 nm

Ferric ion reducing antioxidant power(FRAP) assay에 의한 환원력 측정

FRAP assay는 Benzie 등의 방법을 변형하여 측정하였다 (15) 실험을 위한 반응액은 300 mM acetate buffer(pH 3.6), 10 mM 2,4,6-tripyridyl-s-triazine(TPTZ)(Sigma-Aldrich Chemical Co.), 20 mM FeCl3·6H2O(Sigma-Aldrich Chemical Co.)을 10:1:1의 부피비로 섞어서 제조하였으며, 실험 직전 에 만들어 사용하였다. 96-well plate에 시료액(20 mg/mL) 6 μL와 FRAP 용액 194 μL를 혼합한 후 실온에서 빛을 차단한 상태로 10분간 반응시킨 후 595 nm에서 흡광도를 측정하였다. 결과는 무첨가구(DMSO)에 대한 첨가구의 fold 값으로 나타내었다.

Cupric ion reducing antioxidant capacity (CUPRAC) assay에 의한 환원력 측정

CUPRAC assay는 구리 이온의 환원력을 이용하여 radical 을 환원시킬 수 있는 능력을 확인하는 방법으로 Apak 등의 방법을 변형하여 측정하였다(16). DW:10 mM CuCl2:75 mM neocuproine(Sigma-Aldrich Chemical Co.)을 100:1:1의 부피비로 혼합하여 실험 직전에 사용하였다. 96-well plate 에 시료액(20 mg/mL) 6 μL와 CUPRAC 용액 194 μL를 혼합 한 후 37℃에서 빛을 차단한 상태로 20분간 반응시켜 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 결과는 FRAP assay와 마찬 가지로 무첨가구(DMSO)에 대한 첨가구의 fold 값으로 나 타내었다

세포 배양

본 실험에 사용된 RAW 264.7 세포주와 BV2 세포주는 한국세포주은행(Korean Cell Line Bank, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. RAW 264.7 세포주는 10% FBS (Standard fetal bovine serum, HyClone, Logan, UT, USA), penicillin G(Sigma-Aldrich Chemical Co., 100 IU/mL)와 streptomycin(Sigma-Aldrich Chemical Co., 100 μg/mL)이 첨 가된 DMEM 배지를 사용하여 CO2 incubator(5% CO2, 95% air)에서 37℃의 조건으로 배양하였다. 각 실험에서 세포는 시료를 lipopolysaccharide(LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co.) 첨가 1시간 전에 처리하여 배양한 후, 1 μg/mL 농도의 LPS를 처리하여 실험을 진행하였다. 또한 생쥐의 뇌신경소 교세포(mouse microglial cell line)인 BV2 세포도 위의 조건 과 동일한 조건에서 배양하였다.

세포 독성

RAW 264.7 세포에서 복숭아 핵 및 종자 추출물의 세포 독성을 확인하기 위해 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide(MTT) 시험법을 실시하였다. RAW 264.7 세포를 5×105 cells/mL로 96-well plate에 접종하 고, 1시간 배양 후, 시료를 100 μg/mL의 농도로 처리하여 1시간 동안 배양하였다. 시료가 처리된 세포에 LPS를 1 μg/mL의 농도로 처리한 다음 37℃에서 22시간 배양시켰다. 배지에 희석된 MTT(Sigma-Aldrich Chemical Co.) 용액(0.5 mg/mL)을 세포에 처리하여 4시간 후 MTT를 환원시켜 생 성된 formazan이 배지에서 분리되지 않도록 배지를 제거하 였다. 생성된 MTT-formazan은 DMSO에 용해시켜 540 nm 에서 흡광도를 측정하였다.

Nitric oxide(NO) 라디칼 소거활성 측정

RAW 264.7 세포에 농도별 시료를 처리 한 후 LPS를 1 μg/mL의 농도로 처리하여 24시간 배양하였다. 배양 후 배양액에 생성된 NO의 양은 griess reagent(1% sulfanilic acid:1% napthylamine=1:1)를 이용하여 490 nm에서 흡광도 를 측정하였다.

통계처리

통계처리는 각 그룹 간의 차이를 보기위해 SAS프로그램 을 이용하여 분산분석(analysis of variance)을 실시하고 유 의수준 p<0.05에서 유의적인 차이를 보인 경우 Duncan의 다중범위 시험법(Duncan’ multiple arange test)을 적용하여 사후분석을 실시하였다.

결과 및 고찰

총 phenol 함량 및 총 flavonoid 함량

품종별 복숭아 핵과 종자를 에탄올로 추출하고 총 phenol 함량과 총 flavonoid 함량을 측정한 결과는 Table 2와 같다. Polyphenol 화합물은 분자 하나에 phenol 그룹이 한 개 이상 있는 것으로 식물에서 널리 발견된다(17). Polyphenol의 많 은 수산기는 반응성이 높은 활성 산소 제거에 쓰이며, 여러 단백질 내에 존재하는 sulfhydryl(-SH) 그룹 및 다른 단백질 부분과 결합하는 성질이 있기 때문에 병원균에 대한 항균 작용, 신체대사에 작용 하는 효소 활성 변화 촉진, 유전자 발현 촉진 등의 작용을 한다. 또한 활성 산소 제거 및 노화 억제 등의 항산화 기능을 가지고 있어 각종 질환 치료 및 예방에 이용되고 있다(18). 미황, 가납암백도 및 천홍 핵의 총 phenol 함량은 각각 89.78±1.51, 207.16±2.40 및 218.50±7.21 mg GAE/g 으로 나타나 미황 핵의 phenol 함량 에 비해 가납암백도 핵은 2.3배, 천홍 핵은 2.4배 더 높은 함량을 보였다(p<0.05). 반면, 미황, 가납암백도 및 천홍 종자의 총 phenol 함량은 각각 20.39±0.08, 33.00±0.33 및 24.15±0.14 mg GAE/g 으로 나타나 가납암백도 종자의 총 phenol 함량이 가장 높은 것으로 나타났다.

Table 2. Total phenol and flavonoid contents in stone and seed of peaches
Cultivar1) Total phenol content (mg GAE/g)2) Total flavonoid content (mg CE/g)3)
Stone Seed Stone Seed
MH 89.78±1.514)b5) 20.39±0.08c 28.11±0.11c 10.59±0.49a
KH 207.16±2.40a 33.00±0.33a 110.36±2.16b 5.88±0.06b
CH 218.50±7.21a 24.15±0.14b 172.22±2.62a 6.77±0.11b

MH, Miwhang; KH, Kanoiwa Hakuto; CH, Cheonhong.

Expressed as mg gallic acid equivalent.

Expressed as mg catechin equivalent.

Mean±SD (n=3).

Different letters in the same column indicate significantly different at p<0.05.

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Flavonoid는 flavone을 기본 구조로 갖는 식물의 황색 계 통의 색소의 총칭으로 phenol류도 그 안에 포함된다(19). Flavonoid는 유해산소 및 지질 산화를 방지하는 항산화능 뿐만 아니라 항균, 항암, 항염증, 항동맥경화 등의 효과가 있는 것으로 알려져 있다(20). 미황, 가납암백도및 천홍 핵 의 flavonoid 함량은 각각 28.11±0.11, 110.36±2.16 및 172.22±2.62 mg CE/g으로 나타나 미황 핵의 flavonoid 함량 에 비해 가납암백도 핵은 3.9배, 천홍 핵은 6.1배 더 높은 함량을 보였다(p<0.05). 반면 종자의 flavonoid 함량은 미황, 가납암백도 및 천홍에서 각각 10.59±0.49, 5.88±0.06 및 6.77±0.11 mg CE/g이었으며 미황 종자의 flavonoid 함량이 가장 높았는데, 이는 가납암백도와 천홍과 유의적인 차이 를 보였다.

항산화 활성

복숭아 품종별 핵과 종자 추출물의 항산화 활성 결과는 Table 3과 같다. 비교적 안정한 radical인 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl(DPPH)은 항산화 활성을 갖는 물질과 만나면 환원되어 색이 탈색되는 점을 이용한 항산화 활성 측정 방법으로 DPPH의 환원 정도를 기준으로 측정물질의 환원 력과 항산화력을 확인하는 방법으로 알려져 있다(21). 복숭 아 품종별 핵과 종자의 DPPH 항산화 활성을 비교한 결과, 천홍 핵이 74.2±1.0%로 가장 높은 radical 소거능을 나타냈 으며, 가납암백도와 미황이 각각 73.3±3.6%, 32.8±1.4%의 소거능을 나타냈다. 또한, 종자에서는 천홍이 19.7±0.3%의 소거능을 나타냈으며 미황과 가납암백도가 각각 17.2± 0.9%, 13.9±0.9%로 나타내었다(Tabel 3). 이는 핵 추출물에 서 천홍과 가납암백도의 높은 phenol과 flavonoid 함량에 기인하는 것으로 판단되며, 총 phenol 및 flavonoid 함량의 증가에 따른 높은 항산화 활성 증가에 대한 연구 결과와 일치하였다(22).

Table 3. Antioxidant capacity in stone and seed of peaches using DPPH, FRAP, and CUPRAC assays
Cultivar1) DPPH2) radical scavenging activity (%) FRAP3) Fold (of control) CUPRAC4) Fold (of control)
Stone Seed Stone Seed Stone Seed
MH 32.8±1.45)b6) 17.2±0.9b 12.4±0.3b 3.4±0.2a 8.1±0.1b 3.8±0.1b
KH 73.3±3.6a 13.9±0.9c 23.2±0.2ab 4.9±0.0a 10.3±0.3a 4.5±0.0ab
CH 74.2±1.0a 19.7±0.3a 26.8±1.5a 4.9±0.1a 8.8±0.2b 4.9±0.0a

MH, Miwhang; KH, Kanoiwa Hakuto; CH, Cheonhong.

1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl.

Ferric ion reducing antioxidant power.

Cupric ion reducing antioxidant capacity.

Mean±SD (n=3).

Different letters in the same column indicate significantly different at p<0.05.

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FRAP에 의한 항산화 활성은 free radicals 없이 electron transfer에 기초한 방법으로 시료 추출물 처리 후 ferric tripyridyltriazine(Fe3+-TPTZ)을 ferrous tripyridyltriazine(Fe2+- TPTZ)으로 환원시키는 능력을 측정 하는 방법이다(23). 3 품종의 핵과 종자의 FRAP value를 확인한 결과, 무첨가구 에 비해 핵 추출물에서 각각 천홍, 가납암백도, 미황이 26.8 배, 23.8배, 12.4배의 순으로 높은 활성을 나타내었고, 천홍 이 유의적으로 가장 높은 활성을 나타내었다. 반면 종자의 FRAP 수치는 천홍과 가납압백도가 무첨가구에 비해 4.9배 의 활성을 나타내었고 미황 종자는 3.4배의 활성을 나타내 었다. Table 4

Table 4. Pearson’s cor relation coefficients of DPPH, CUPRAC, FRAP, nitr ic oxide generation in BV2 and RAW 264.7 cells, TPC and TFC
DPPH1) CUPRAC2) FRAP3) NO in BV24) NO in RAW 264.75) TPC6) TFC7)
DPPH 1 0.900**8) 0.970** -0.049 -0.713** -0.300 -0.292
CUPRAC - 1 0.853** -0.277 -0.738** -0.308 -0.243
FRAP - - 1 -0.210 -0.761** -0.253 -0.288
NO in BV2 - - - 1 0.482 -0.112 -0.036
NO in RAW 264.7 - - - - 1 0.101 0.148
TPC - - - - - 1 0.941
TFC - - - - - - 1

1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl.

Cupric ion reducing antioxidant capacity.

Ferric ion reducing antioxidant power.

Nitric oxide in BV2 cells.

Nitric oxide in RAW 264.7 cells.

Total phenol content.

Total flavonoid content.

*p<0.05,**p<0.01.

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CUPRAC활성은 구리이온(Cu2+)의 전자를 받아들어 Cu+ 로 환원되는 것을 이용한 방법으로 추출 시료의 Cu2+의 환원되는 능력을 통해 항산화 능력을 확인하는 방법이다 (24). 품종별 복숭아 핵과 종자 추출물에서는 무첨가구 대비 가납암백도 핵이 10.3배의 활성을 나타났으며, 천홍과 미황 이 각각 8.8배와 8.1배의 활성이 관찰되었다. 종자 추출물에 서의 CUPRAC 활성은 무첨가구에 비해 천홍, 가납암백도, 미황 순으로 각각 4.9배, 4.5배 그리고 3.8배의 활성을 나타 내었다.

항염증 활성

본 연구에서는 복숭아 3품종의 핵과 종자 추출물의 항염 증 활성을 조사하기 위해 LPS 자극에 의해 유도된 RAW 264.7 대식세포(macrophage)와 BV2 소교세포(microglia)의 염증 반응에서 nitric oxide(NO)의 억제 활성을 측정하였다. 면역세포중의 하나인 대식세포는 내재면역뿐만 아니라 적 응면역 등 다양한 숙주 반응에 관여하여 많은 항염 작용 연구에 이용되고 있다(25). BV2 소교세포(microglia)는 뇌 에 존재하는 대식세포로 monocyte에서 분화되어 중추신경 계에 있는 비신경세포로 병원균 감염이나 뇌 손상에 대해 반응해 염증성 cytokine, 단백질 분해 효소, 활성 산소 등을 생성하여 보호하는 면역세포이나, 만성 염증이 유발하면 뇌 조직의 손상 및 세포사가 유발되기 때문에 신경 퇴행성 질환의 주요 원인이 되는 것으로 알려져 있다(26,27).

품종별 복숭아 핵과 종자의 항염증 활성을 측정한 결과 는 Fig. 1, 2와 같다. RAW 264.7 세포에서 각각의 핵 추출물 을 100 μg/mL의 농도로 처리한 실험구에서의 NO 생성량은 미황이 대조구에 비해 29.60±3.09%로 관찰되었고, 가납암 백도는 26.49±8.02%, 천홍은 42.10±10.72%로 관찰되었으 며, 품종간의 항염 활성 비교에서 3품종 모두 유의적인 차이 를 나타내지 않았다(Fig 1A). 종자 추출물을 100 μg/mL의 농도로 처리한 실험구에서는 각각 미황이 76.08±1.40%, 가납암백도가 59.16±11.92% 그리고 천홍이 73.61±7.24% 로 3품종 모두 유의적인 차이를 나타내지 않았으며, 핵 추출 물에 비해 낮은 항염 활성이 관찰되었다(Fig 1B). 또한, BV2 세포에서 3품종의 핵 추출물의 NO 생성량은 대조구에 비해 각각 미황은 9.05±4.02%, 가남압백도는 21.68±14.33% 그 리고 천홍은 35.03±8.95%로 관찰되었다(Fig 2A). 특히 미황 과 가납암백도 핵 추출물의 경우 LPS를 처리하지 않은 무처 리구의 NO 생성량과 대비하여 적은양의 NO가 관찰되어 강력한 항염 활성을 나타내었으며, 천홍 핵 추출물에 비하 여 7.98-38.95% 높은 항염 활성을 나타내었다. 또한, 종자 추출물을 처리한 실험구에서는 미황이 52.63±3.89%, 가납 암백도는 43.56±13.97%, 천홍은 56.45±2.73%의 NO 생성 량을 나타내었으며, 품종간의 항염 활성 비교에서 3품종 모두 유의적인 차이를 나타내지 않았다(Fig 2B). 본 연구의 결과로 복숭아 3품종의 핵 추출물은 RAW 264.7 세포 및 BV2 세포에서 강력한 항염 활성을 나타내는 것으로 관찰 되었으며, 종자 추출물에서도 대조구에 비해 비교적 높은 항염 활성을 나타내었다. 이와 같은 연구결과는 복숭아 3품 종의 핵과 종자가 전반적으로 염증 반응의 억제 뿐 만 아니 라 뇌질환 관련 염증 치료 소재 개발의 기초자료로 충분한 가치가 있다고 판단된다.

kjfp-25-1-90-g001
Fig. 1. Effect of (A) stone and (B) seed of peaches on production of nitr ic oxide and cell viability in RAW 264.7 cells. MH, Mihwang; KH, Kanoiwa Hakuto; CH, Cheonhong. Values are means±SD of triplicate determinations. Different superscripts within a column indicate significant differences (p<0.05). Final concentration, 100 μg/mL.
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kjfp-25-1-90-g002
Fig. 2. Effect of (A) stone and (B) seed of peaches on production of nitric oxide and cell viability in BV2 cells. MH, Mihwang; KH, Kanoiwa Hakuto; CH, Cheonhong. Values are means±SD of triplicate determinations. Different superscripts within a column (a-b) indicate significant differences (p<0.05). Final concentration, 100 μg/mL.
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상관 관계

복숭아 3품종 핵과 종자의 총 phenol 및 총 flavonoid 함량 의 상관성이 0.941로 유의적인 높은 상관관계를 나타냈다 (p<0.01). 항산화 활성간의 상관성은 FRAP 활성과 DPPH 활성 간의 상관성(0.970, p<0.01), CUPRAC 활성과 DPPH 라디칼 소거능 간의 상관성(0.900, p<0.01) 그리고, CUPRAC 활성과 FRAP 활성의 상관성(0.853, p<0.01)순으 로 모두 유의적으로 정(+)의 관계가 확인되었다. 이에 반해 총 phenol 및 총 flavonoid 함량은 항산화 활성들 간의 상관 관계에서 유의적인 상관성을 나타내지 않았다. 이는 핵과 종자의 항산화 활성이 flavonoid성 phenol 화합물이 아닌 non-flavonoid성 phenol 화합물의 작용에 의한 것으로 예상 되었다. 또한 항염 활성과 항산화 활성들 간의 상관성은 낮게 확인되었으며 항염 활성과 총 phenol 및 flavonoid 함량 간은 낮은 상관관계를 나타내며 이는 flavonoid성 phenol 화합물이 항염 반응에는 낮게 관여한다는 것을 확인 할 수 있다. 따라서 본 연구에서 복숭아 3품종 핵과 종자의 non-flavonoid성 phenol 화합물이 다양한 항산화 활성뿐 만 아니라 항염 세포 활성에 작용 할 것이라 사료된다.

요 약

본 연구에서는 현재 재배되고 있는 복숭아 품종 중 미황, 가납암백도 및 천홍의 핵과 종자를 이용하여 항산화 및 항염증 활성에 관한 연구를 하였다. 총 phenol 및 flavonoid 함량은 3품종 모두 종자에 비해 핵에서 월등히 높았으며, 품종간에는 천홍의 핵에서 가장 높은 함량을 나타내었다. DPPH radical 소거능과 FRAP 및 CUPRAC에 의한 항산화 활성은 3품종 모두 종자에 비해 핵에서 활성이 높았고, DPPH radical 소거활성은 가납암백도와 천홍, FRAP 활성 은 천홍, CUPRAC 활성은 가납암백도에서 유의성 있게 높았다. NO 생성 억제 효과는 RAW 264.7 세포의 경우 핵 추출물에서 가납암백도 74%, 미황 70% , 천홍 58%이며. BV2 세포의 경우 미황 90%, 가납암백도 78%, 천홍 65%로 각각 염증 반응을 감소시켰다. 복숭아 3품종 핵과 종자의 총 phenol 함량과 총 flavonoid 함량은 높은 상관 관계를 나타내었고, 항산화 활성간의 상관성은 모두 유의적인 관 계가 확인되었으나, 항염 활성과 항산화 활성, 항염 활성과 총 phenol 및 flavonoid 함량간은 낮은 상관관계를 나타내 었다.

Acknowledgements

본 연구는 경상북도농업기술원 연구기술개발지원 사업 의 연구비 지원에 의해 수행되었으며 이에 감사드립니다.

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